Один из самых распространённых «квартирантов» нашего организма — это вирус герпеса человека 6 типа. По разным данным, им инфицированы более 90% людей. Первая встреча чаше всего происходит в раннем детстве. Попав в организм вирус получает постоянную прописку, причем без согласия самого хозяина. В обычных условиях вирус не проявляет себя явным образом и находится в так называемом латентном состоянии. Лечение ВГЧ-6 инфекции в большинстве случаев не требуется. Реактивация вируса происходит при снижении защитных свойств организма. Существует три стадии ВГЧ-6 ассоциированной инфекции: первичная инфекция (постнатальная), реактивация (возможная реинфекция), хроническая инфекция (с возможной спорадической реактивацией).
Вирус герпеса человека 6 типа ассоциируется с различными клиническими синдромами и заболеваниями. Так, доказана связь вируса с такими нозологиями, как внезапная экзантема, инфекционный мононуклеоз, тромбоцитопения, анемия, гепатит и колит. Есть сообщения о потенциальной связи ВГЧ-6-инфекции с развитием лимфомы Ходжкина и реакции «трансплантат против хозяина» которая довольно часто возникает после трансплантации аллогенных стволовых гемопоэтических клеток. В связи с этим своевременная диагностика вирусной инфекции особенно актуальна у пациентов с заболеваниями системы крови.
Врач клинической лабораторной диагностики отделения инфекционной безопасности трансфузий НМИЦ гематологии Минздрава России Татьяна Андреевна Солдатова:
«ВГЧ-6 пожизненно персистирует в организме человека путем становления латентной инфекции, которая преимущественно осуществляется посредством интеграции генома вируса в теломерные участки хромосом клеток хозяина. Способность вызывать субклинические формы заболевания определяют трудности диагностики этой инфекции. Еще усложняет ситуацию характерное для ВГЧ–6 состояние хромосомной интеграции, когда вирус внедряет свой геном в соматическую клетку. В этом случае встроенный геном вируса несут в себе только определенный тип клеток. А если геном вируса встроился в половые клетки, то вирус может передаться дальше, и человек может стать родителем ребенка, у которого все клетки организма будут нести вирусный геном. Такая ситуация называется наследуемой хромосомной интеграцией».
Идентификация вируса герпеса человека из выделенных образцов нуклеиновых кислот. Врач клинической лабораторной диагностики отделения инфекционной безопасности трансфузий НМИЦ гематологии Минздрава России Т.А. Солдатова.
Наследуемый хромосомно-интегрированный ВГЧ6 встречается примерно у 1% людей. Отмечается, что у них при ПЦР-исследовании любого материала определяется высокая вирусная нагрузка. Этот факт и способность вируса вызывать субклинические формы заболевания сильно затрудняет своевременную диагностику активной инфекции у пациентов с наследуемым хромосомно-интегрированным ВГЧ-6.
Врач клинической лабораторной диагностики отделения инфекционной безопасности трансфузий НМИЦ гематологии Минздрава России Татьяна Андреевна Солдатова:
«Задача лабораторной диагностики – доказать наличие вируса в исследуемом образце, определить стадию инфекции, по возможности её тип и вирусную нагрузку. Для решения данных задач в лаборатории НМИЦ гематологии используется метод Real-time PCR. Метод основан на проведении одновременной реакции амплификации участка ДНК ВГЧ-6 внутреннего контрольного образца (искусственно синтезированной конструкции, не встречающейся в природе) и участка глобинового гена, который присутствует во всех ядросодержащих клетках организма. Таким образом, детектируется три мишени: вирусная, клеточная и внутренний контроль».
Для обнаружения наследуемой хромосомной интеграции ВГЧ-6 у пациентов НМИЦ гематологии Минздрава России разработан алгоритм диагностики. Учитываются результаты ПЦР-исследований проведенных у пациента за весь период наблюдения, оценивается вирусная нагрузка и соотношение вирусной и клеточной ДНК в крови. Для подтверждения наследственной интеграции проводится дополнительное исследование.
Пересчитанный результат с помощью аппарата Rotor Gene Q и программы FRT Manager
Кривые роста сигнала флуоресценсции по каналу, который регистрирует непосредственно ДНК ВГЧ-6. Врачи учитывают форму кривой, силу сигнала, сравнивают её с контрольной кривой и делают заключение о наличии и количестве интересующей молекулы.
Врач клинической лабораторной диагностики отделения инфекционной безопасности трансфузий НМИЦ гематологии Минздрава России Татьяна Андреевна Солдатова:
«Если в аспирате костного мозга, крови, а также в слюне или моче первичного пациента выявляется высокая концентрация ДНК вируса, рекомендуется направить на ПЦР-исследование образцы ногтевых пластин и волосяных фолликулов. В клетках этих тканей вирус не реплицируется, и его там изначально быть не должно. В случае положительного результата мы можем смело утверждать, что у пациента вирус, интегрированный в геном, передался по наследству. Завершающий этапом в случае подозрения на герпесвирусную инфекцию будет подтверждение реактивации вируса».
Заведующий лабораторией вирусологии НМИЦ гематологии Минздрава России, к.б.н. Дмитрий Сергеевич Тихомиров:
«Использование количественных методов ПЦР диагностики может быть недостаточно для четкого разделения активной и латентной инфекции у пациентов с хромосомной интеграцией, что требует поиска и внедрения новые методов диагностики. Еще одна задача – определение пороговых значений вирусной нагрузки у гематологических пациентов. В последующем это может стать существенным подспорьем в работе врачей клиницистов при решении вопроса о целесообразности назначения противовирусной терапии».
